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    大鼠骨髓間充質干細胞的分離方法主要有這兩種

    發表時間:2022-04-06  |  點擊率:87
      大鼠骨髓間充質干細胞是在哺乳動物骨髓基質中發現的細胞亞群,具有多種分化潛能,可分化成骨、軟骨、脂肪、神經和成肌細胞。它們不僅機械地支持骨髓中的造血干細胞(HSC),而且還分泌多種生長因子(如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF)來支持造血。
      常用的MSC分離方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法。全骨髓法是根據干細胞在低血清培養基中的優勢特性,定期更換溶液去除非貼壁細胞,從而達到純化和擴增MSC的目的。密度梯度離心是根據骨髓中各細胞成分的不同比例,分離出單核細胞進行貼壁培養,兩者本質上沒有太大區別。隨著對MSC表面抗原認識的深入,有人采用免疫方法,如流式細胞儀、免疫磁珠等。然而,流式或磁珠分選細胞增殖緩慢等問題,加上成本高、技術難度大等問題,在一定程度上限制了這些方法的廣泛應用。

     

    大鼠骨髓間充質干細胞
     

     

      大鼠骨髓間充質干細胞細胞培養必須保持工作區域無菌和清潔。先用紫外線燈和臭氧消毒1h,然后通風30min。操作前需更換細胞間專用拖鞋,戴上一次性橡膠手套并用75%乙醇消毒,戴上實驗服,戴上一次性口罩和帽子,操作時不要大聲說話,整個無菌操作應在酒精燈周圍進行。
      在大鼠骨髓間充質干細胞的原代培養過程中,可在約24小時內發生貼壁生長。細胞呈圓形、梭形和三角形,生長緩慢。液體交換后細胞增殖明顯,呈梭形為主,形態多樣。70%-80%可在10-14天融合,達到通過標準。傳代細胞形狀單一,有紡錘形或扁平形,增殖至細胞融合時呈渦旋狀和放射狀排列。
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